Endo H糖苷內(nèi)切酶H：結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Endo H）是一種專門切割N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,，用于糖生物學(xué)和蛋白質(zhì)工程領(lǐng)域,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制,、以及其在研究和臨床應(yīng)用中的潛力,。引言N-連接糖基化是一種在真核細(xì)胞中普遍存在的蛋白質(zhì)修飾方式，涉及將糖鏈添加到蛋白質(zhì)的天冬酰胺殘基上,。Endo H作為一種內(nèi)切酶,，能夠特異性地識(shí)別并切割N-連接糖鏈中的β-N-乙酰葡糖胺苷鍵，從而在蛋白質(zhì)工程和生物制藥中發(fā)揮重要作用,。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H通常來(lái)源于流感嗜血桿菌（Hemophilus influenzae）,，其分子質(zhì)量約為50 kDa。該酶由兩個(gè)結(jié)構(gòu)域組成：一個(gè)負(fù)責(zé)識(shí)別糖鏈的催化結(jié)構(gòu)域和一個(gè)有助于酶穩(wěn)定性的非催化結(jié)構(gòu)域,。催化機(jī)制Endo H的催化機(jī)制涉及對(duì)N-連接糖鏈的特異性識(shí)別和切割,。酶的活性位點(diǎn)含有多個(gè)氨基酸殘基，這些殘基與糖鏈的特定結(jié)構(gòu)相互作用,，導(dǎo)致酶對(duì)底物的高特異性,。Endo H催化的糖苷鍵斷裂是一水解反應(yīng)，需要水分子的參與,。泛素是一種小分子蛋白,，存在于真核生物中,，它在細(xì)胞內(nèi)起到調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)降解、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、細(xì)胞周期控制,。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag

Endo H糖苷內(nèi)切酶H：結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Endo H）是一種專門作用于糖鏈的內(nèi)切酶,，對(duì)研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義,。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用,。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,，對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用,。Endo H是一種能夠特異性識(shí)別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,，其分子量約為130 kDa,。該酶具有一個(gè)催化中心，能夠識(shí)別并切割特定的糖苷鍵,。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,，但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定。催化機(jī)制Endo H通過(guò)水解N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）與N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）之間的β-1,4糖苷鍵,，從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈,。該過(guò)程不涉及輔因子，表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點(diǎn)的氨基酸殘基,。Recombinant Human PRAK Protein,Strep-II Tag全長(zhǎng)膜蛋白由于其天然構(gòu)象,，是跨膜蛋白藥物開(kāi)發(fā)中的好的抗原。在細(xì)胞中的表達(dá)水平通常較低,。

α-凝血酶（α-Thrombin）是一種高度特異性的絲氨酸蛋白酶,，由凝血酶原（Prothrombin，II因子）經(jīng)蛋白水解活化而來(lái),。它在凝血過(guò)程中起著非常重要的作用,，不僅能夠促使纖維蛋白凝塊的產(chǎn)生，還負(fù)責(zé)提供反饋信號(hào)來(lái)尋找前輔因子：V因子和VIII因子,。也可以用作血管收縮劑。在體內(nèi),，活化的X因子（FactorXa）切割凝血酶原,，釋放出活性肽并將凝血酶切割成具有催化活性的α-凝血酶。α-凝血酶由一條輕鏈（Achain）（Mw~6,000）和一條重鏈（Bchain）（Mw~31,000）通過(guò)二硫鍵連接而成,。某些情況下,，α-凝血酶會(huì)發(fā)生自溶生成β-凝血酶和γ-凝血酶。β-凝血酶由對(duì)α-凝血酶A鏈水解并切割含有B鏈糖基化位點(diǎn)的小片段（B1，B2）組合而成,。除了用于凝血研究之外,，α-凝血酶還常用來(lái)位點(diǎn)特異性切割融合蛋白?；蛑亟M時(shí)將凝血酶識(shí)別位點(diǎn)插入在目的蛋白與利于后續(xù)純化和/或表達(dá)的多肽或者蛋白之間,，通過(guò)凝血酶切割表達(dá)的重組子即可釋放目的蛋白。凝血酶本身可通過(guò)親和層析技術(shù)快速去除,。本品是由勻質(zhì)化的人凝血酶原經(jīng)由Xa因子,，Va因子和磷脂活化而得，經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)確保凝血酶原的完全活化,，并以NIH凝血酶的標(biāo)準(zhǔn)品為參考,，提供的酶活力不少于3091NIHU/mg。

抑肽酶（Aprotinin）,，又稱為抑蛋白酶肽,，是一種競(jìng)爭(zhēng)性、可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑,，可與絲氨酸蛋白酶形成穩(wěn)定復(fù)合物并阻斷酶的活性位點(diǎn),，這種結(jié)合是可逆的，大多數(shù)的抑肽酶-蛋白酶復(fù)合物在極端的pH<3.0的條件下解除結(jié)合,。抑肽酶抑制糜蛋白酶,、胰蛋白酶、激肽釋放酶和血纖維蛋白溶酶,，不能抑制Xa因子和凝血酶,。從結(jié)構(gòu)上來(lái)說(shuō)，抑肽酶是一種來(lái)自牛肺的單體球狀蛋白,，由58個(gè)氨基酸組成并排列在具有三個(gè)交聯(lián)二硫鍵的單個(gè)多肽鏈中,。重組抑肽酶采用大腸桿菌表達(dá)，在GMP法規(guī)下生產(chǎn),，不含任何動(dòng)物源成分,，無(wú)動(dòng)物源性的病毒污染，氨基酸序列與來(lái)源于牛肺的抑肽酶完全一致,，具有與動(dòng)物源性抑肽酶相同的酶學(xué)性質(zhì),，可替代動(dòng)物源性抑肽酶用于各種生物技術(shù)過(guò)程中，如：重組蛋白生產(chǎn)中抑制絲氨酸蛋白酶的活性,；細(xì)胞培養(yǎng)等,。C5aR（C5a 受體）是補(bǔ)體系統(tǒng)的一部分，它有兩種已知的受體：C5aR1（CD88）和C5L2,。

糖苷酶F(PNGaseF)是一種酰胺水解酶,，經(jīng)過(guò)和平空間站伊麗莎菌克隆,，主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。N-糖苷酶F(PNGaseF)在酵母中重組表達(dá)（比活性：100000U/mL）,，可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖,、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGaseF的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵,，同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸,。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽，常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化,。另外,，我司還提供其他類型的糖苷酶，包括酵母重組表達(dá)的N-糖苷酶F（比活性：750000U/mL）,，內(nèi)切糖苷酶H,，內(nèi)切糖苷酶S。產(chǎn)品信息產(chǎn)品性質(zhì)中文別名（Chinesesynonym）N-糖酰胺酶F,；N-糖苷酶F英文別名（Englishsynonym）PNGaseF來(lái)源（Source）酵母重組表達(dá)分子量（Molecularweight）36kDa比活性（Specificactivity）100000U/mL緩沖液組分（Buffer）20mMTris-HClpH7.5,50mMNaCl,5mMEDTA,50%Glycerolα-凝血酶是研究血液凝固機(jī)制和血栓性疾病發(fā)展的主要靶點(diǎn),。重組α-凝血酶用于體外測(cè)定。Recombinant Mouse IL-5 R alpha/CD125 Protein,His Tag

使用全長(zhǎng)A2AR蛋白進(jìn)行藥物篩選：全長(zhǎng)A2AR蛋白可以用于ELISA,、SPR親和分析,，以篩選和優(yōu)化潛在的A2AR調(diào)節(jié)劑。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag

牛凝血酶（Bovine Thrombin）,，作為一種高特異性的絲氨酸蛋白水解酶,，具有重要的生物學(xué)功能的科研應(yīng)用。本文綜述了牛凝血酶的分子特性,、生物學(xué)作用及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,。引言凝血酶是血液凝固過(guò)程中的關(guān)鍵酶，負(fù)責(zé)將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，從而促進(jìn)血栓形成,。牛凝血酶因其高比活度（>2000 IU/mg）和高純度，在生物醫(yī)學(xué)研究中用作工具酶,。材料與方法產(chǎn)品來(lái)源與純化：牛凝血酶從牛血漿中提取,，并通過(guò)一系列生物技術(shù)手段進(jìn)行純化?；钚詼y(cè)定：利用特定的底物或熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）底物測(cè)定凝血酶活性,。應(yīng)用研究：通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)模型，研究牛凝血酶在血液學(xué),、分子生物學(xué)和藥物開(kāi)發(fā)中的應(yīng)用,。結(jié)果分子特性：牛凝血酶由兩條肽鏈組成，分子量約為37 KD,，具有高度的專一性和高效的催化能力,。生物學(xué)作用：牛凝血酶能夠催化纖維蛋白原水解釋放A肽和B肽，形成纖維蛋白單體,，參與血液凝固和傷口愈合,。科研應(yīng)用：牛凝血酶在重組蛋白的特異性斷裂,、基因工程產(chǎn)品開(kāi)發(fā),、以及作為診斷學(xué)中的凝血化驗(yàn)工具等方面展現(xiàn)出重要價(jià)值。Recombinant Biotinylated Human CD155/PVR Protein,His-Avi Tag