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pA-MNase(蛋白A-微球菌核酸酶)在以下實(shí)驗(yàn)中特別有用:1.**ChIC(ChromatinImmunocleavage)**:這是一種用于研究蛋白質(zhì)-DNA相互作用的技術(shù),,pA-MNase在此技術(shù)中用于在免疫沉淀后切割染色質(zhì)DNA,以分析特定蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合位點(diǎn),。2.**CUT&RUN(CleavageUnderTargetsandReleaseUsingNuclease)**:這是一種蛋白質(zhì)-基因組互作研究技術(shù),,pA-MNase在此技術(shù)中用于在目標(biāo)蛋白質(zhì)被抗體識(shí)別后,通過(guò)核酸酶活性切割附近的DNA,,從而釋放與目標(biāo)蛋白質(zhì)相互作用的DNA片段,。CUT&RUN技術(shù)相比傳統(tǒng)的ChIP-Seq具有實(shí)驗(yàn)周期短,、信噪比高,、可重復(fù)性好以及細(xì)胞投入量低的優(yōu)勢(shì),尤其適用于早期胚胎發(fā)育,、干細(xì)胞,、**以及表觀遺傳學(xué)等研究領(lǐng)域。3.**染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)**:pA-MNase在染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)中用于染色質(zhì)片段化,,它在核小體間DNAlinker上進(jìn)行切割保持了核小體的完整性,,并且由于其溫和的酶解條件,消除了超聲功率的可變性和超聲過(guò)程中染色質(zhì)乳化所帶來(lái)的負(fù)面影響,。4.**去除核酸污染**:pA-MNase也可用于去除細(xì)胞裂解液中的核酸,,以減少樣品的粘度,這對(duì)于后續(xù)的蛋白質(zhì)分析實(shí)驗(yàn)尤為重要,。
在質(zhì)粒DNA提取過(guò)程中,,確保DNA的完整性和活性至關(guān)重要,,這通常涉及以下幾個(gè)關(guān)鍵因素:1.**溫和的裂解條件**:選擇適當(dāng)?shù)牧呀夥椒▽?duì)于保持DNA的完整性至關(guān)重要。對(duì)于大于15kb的質(zhì)粒DNA,,應(yīng)采用溫和的裂解方法,,如將細(xì)菌懸浮于等滲的葡萄糖溶液中,加入溶菌酶和EDTA破壞細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,,以減少對(duì)質(zhì)粒DNA的機(jī)械剪切力,,從而保護(hù)其完整性。2.**避免過(guò)度裂解**:在質(zhì)粒提取過(guò)程中,,并非裂解時(shí)間越長(zhǎng)越好,。過(guò)長(zhǎng)的裂解時(shí)間可能會(huì)造成基因組DNA片段的污染,影響質(zhì)粒的純度。3.**適當(dāng)?shù)南礈旌拖疵?*:在純化過(guò)程中,,適當(dāng)?shù)南礈炜梢匀コ鞍踪|(zhì)和其他雜質(zhì),,但過(guò)度洗滌可能會(huì)導(dǎo)致DNA的損失。洗脫步驟中,,確保洗脫液完全浸潤(rùn)柱膜,,以保證結(jié)合在柱膜上的質(zhì)粒得以充分洗脫,避免因洗脫體積過(guò)小而影響質(zhì)粒得率,。4.**避免DNA的降解**:在提取過(guò)程中,,添加核酸酶抑制劑可以防止DNA被核酸酶降解。同時(shí),,避免長(zhǎng)時(shí)間將DNA暴露在室溫下,,以及避免多次凍融循環(huán),這些都有助于保護(hù)DNA的完整性,。5.**低溫操作**:盡量在低溫條件下進(jìn)行提取操作,,以減少核酸酶的活性,從而保護(hù)DNA的完整性,。
Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) 是一種從嗜熱脂肪芽孢桿菌(Thermophilic Geobacillus sp)DNA聚合酶I衍生的酶,缺乏5'-3'外切核酸酶活性,。以下是關(guān)于Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)的一些關(guān)鍵信息:來(lái)源和特性:Bst Plus DNA Polymerase 具有更強(qiáng)的5'-3' DNA聚合酶活性,、鏈置換活性和dUTP耐受性,適合用于抗污染的等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),,如LAMP和CPA等,。應(yīng)用:主要應(yīng)用于等溫DNA擴(kuò)增,包括環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),。規(guī)格:活性定義:1 U指的是在65°C下30分鐘內(nèi)將10 nmol的dNTP整合到酸不溶物質(zhì)中的酶的量,。溶液成分:包含10 mmol/L Tris-HCl、50 mmol/L KCl,、0.1 mmol/L EDTA,、1 mmol/L DTT、0.1% Triton X-100,、50% 甘油,,pH 7.5 @ 25℃。產(chǎn)品形式:提供的產(chǎn)品包括Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL),,貨號(hào)14402ES,,以及凍干粉形式的產(chǎn)品,,貨號(hào)14405ES,不含甘油,。靈敏度和穩(wěn)定性:Bst Plus DNA Polymerase 具有高靈敏度,,低至5copies目的基因可測(cè),且在飛克(fg)級(jí)別的模板量下也能快速達(dá)到閾值,。在37°C下,,該酶可以保持相對(duì)穩(wěn)定的效應(yīng)長(zhǎng)達(dá)5天,并且在-20℃下可以穩(wěn)定保存2年,。儲(chǔ)存條件:建議在-25℃至-15℃下儲(chǔ)存,,以保持產(chǎn)品活性,并避免反復(fù)凍融,。
BstDNAPolymerase,LargeFragment(嗜熱脂肪芽孢桿菌DNA聚合酶大片段)是一種常用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的酶,,特別是在等溫DNA擴(kuò)增技術(shù)中。以下是一些關(guān)于BstDNAPolymerase,LargeFragment的關(guān)鍵信息:1.**來(lái)源**:這種酶來(lái)源于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus),,是一種熱穩(wěn)定的DNA聚合酶,。2.**活性**:BstDNAPolymerase,LargeFragment具有5'到3'的DNA聚合酶活性,并且具有鏈置換活性,,這使得它能夠用于等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng),,如環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP),。3.**熱穩(wěn)定性**:由于其嗜熱特性,,BstDNAPolymerase,LargeFragment能夠在較高的溫度下保持活性,通常在60-65°C,。4.**應(yīng)用**:-**等溫?cái)U(kuò)增**:用于LAMP和其他等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),,這些技術(shù)不需要傳統(tǒng)的熱循環(huán)儀。-**全基因組擴(kuò)增**:用于快速擴(kuò)增少量DNA樣本,,以進(jìn)行進(jìn)一步的分析,。-**突變檢測(cè)**:在某些情況下,用于檢測(cè)特定基因的突變,。5.**優(yōu)點(diǎn)**:-**高保真度**:與某些其他DNA聚合酶相比,,BstDNAPolymerase,LargeFragment具有較高的保真度。-**快速擴(kuò)增**:等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)快速產(chǎn)生大量DNA,。UBE2L3作為泛素化途徑中的關(guān)鍵酶,,其在蛋白質(zhì)降解、信號(hào)傳導(dǎo),、細(xì)胞周期控制等重要內(nèi)容有著作用,。
磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒是一種利用磁性納米顆粒固相核酸富集技術(shù)來(lái)純化質(zhì)粒DNA的產(chǎn)品。它通常包括高性能納米磁珠和獨(dú)特的緩沖體系組合,,通過(guò)裂解菌體后釋放的DNA,,能夠有效地結(jié)合于磁珠表面,,漂洗除雜后獲得高質(zhì)量的目的質(zhì)粒。以下是磁珠法質(zhì)粒小量抽提試劑盒的一些主要特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**快速簡(jiǎn)便**:操作步驟簡(jiǎn)單,,無(wú)需多次離心,,整個(gè)抽提過(guò)程通常只需20-25分鐘。2.**高得率和純度**:可以從1-5ml新鮮大腸桿菌菌液中分離純化2-20μg高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA,。純化得到的DNA質(zhì)量高,,完整性好,OD260/280比值一般為1.8~1.9之間,,OD260/230比值大于2.0,。3.**適用性廣**:適用于1-5mL小體積高通量菌液質(zhì)粒抽提,且抽提所得的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切,、測(cè)序,、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等各種下游分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),。4.**自動(dòng)化兼容**:可整合移液法自動(dòng)化儀器和磁棒法自動(dòng)化儀器進(jìn)行高通量提取實(shí)驗(yàn),。5.**安全性高**:操作過(guò)程中不涉及酚/氯仿等有毒試劑,更加環(huán)保和安全,。6.**成本效益**:相比傳統(tǒng)的離心柱法,,磁珠法可以減少離心次數(shù),獲得完整性更好的質(zhì)粒,,且操作更為簡(jiǎn)便快捷,。7.**操作靈活**:磁珠的使用量可靈活調(diào)節(jié),適合不同體積和濃度的樣品處理,。在cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE)技術(shù)中,,Ultra-Long Master Mix 可以用來(lái)擴(kuò)增5'和3'末端的長(zhǎng)片段cDNA。Recombinant Human AREG Protein,hFc Tag
多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶體識(shí)別,。26S蛋白酶體由一個(gè)20S顆粒和兩個(gè)19S調(diào)節(jié)顆粒組成,。Recombinant Human AGR-2 Protein,His Tag
磁珠法PCR/DNA純化試劑盒在科研中的應(yīng)用非常廣,主要包括以下幾個(gè)方面:1.**PCR產(chǎn)物的純化**:磁珠法試劑盒可以從PCR反應(yīng)液中回收不同片段大小的DNA,,有效去除酶,、dNTP、鹽類等雜質(zhì),,回收率高,,產(chǎn)物純度好,可以直接應(yīng)用于PCR,、連接,、測(cè)序、NGS建庫(kù)等下游實(shí)驗(yàn),。2.**基因組DNA的提取**:適用于從血液,、唾液,、口腔拭子和動(dòng)物組織等樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA,提取的DNA片段大,,純度高,,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適合高通量工作站的自動(dòng)化提取,。3.**質(zhì)粒DNA的提取**:磁珠用于從粗制的提取物中分離質(zhì)粒DNA,,通過(guò)精心優(yōu)化的溶液將質(zhì)粒DNA從基因組DNA和蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。4.**DNA片段的分離**:有許多類型的DNA分離試劑盒可供選擇,,包括DNA片段的分離,。DNA片段可能需要為下一代測(cè)序協(xié)議進(jìn)行分離,在這種情況下,,可以用能選擇分子大小的磁珠來(lái)分離片段,。5.**自動(dòng)化和高通量操作**:磁珠法試劑盒適合手工操作,也可用于自動(dòng)化工作站或核酸自動(dòng)提取儀,,實(shí)現(xiàn)高通量操作,。6.**分子生物學(xué)研究**:磁珠法試劑盒在基因組研究、分子進(jìn)化研究等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,,為遺傳病研究,、篩查等提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。Recombinant Human AGR-2 Protein,His Tag