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磁珠法病毒RNA/DNA抽提試劑盒是一種高效,、便捷的工具,,適用于從各種生物樣本中提取病毒核酸。以下是一些相關(guān)產(chǎn)品的信息和特點(diǎn):1.**德諾優(yōu)品病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-采用自主磁珠純化技術(shù),,適合從血漿,、血清等樣本中分離純化病毒的DNA或RNA。-操作簡(jiǎn)單,,整個(gè)過(guò)程可在12-25分鐘內(nèi)完成,提取的核酸可直接用于下游應(yīng)用,,如PCR和NGS等,。-提取的核酸純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,,適合低拷貝數(shù)的病毒檢測(cè),。2.**MolPure®磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適用于從全血、血清,、腦脊液等樣本中提取病毒核酸,。-無(wú)需使用有毒的酚氯仿,安全快捷,,提取過(guò)程可在40分鐘內(nèi)完成,。-提取的產(chǎn)物可直接用于PCR、qPCR等實(shí)驗(yàn),。3.**FineMag快速磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒**:-適合從全血,、唾液、拭子等樣本中純化高質(zhì)量病毒核酸,,提取過(guò)程只需13分鐘,。-無(wú)需使用有毒的化學(xué)試劑,操作安全便捷,。4.**MagMAX病毒RNA/DNA提取試劑盒**:-適用于從全血,、血清、口腔液等樣本中提取病毒核酸,。-該試劑盒支持高通量提取,,適合自動(dòng)化操作,提取效率高,適合直接用于PCR和RT-PCR,。
T7EndonucleaseI(T7EI)是一種特殊的DNA內(nèi)切酶,,具有以下特點(diǎn):1.**識(shí)別錯(cuò)配DNA**:T7EI能夠識(shí)別并切割不完全配對(duì)的DNA、十字型結(jié)構(gòu)DNA,、Holliday結(jié)構(gòu)或交叉DNA以及異源雙鏈DNA,。2.**切割位點(diǎn)**:T7EI切割錯(cuò)配位點(diǎn)5'端的、第二或第三個(gè)磷酸二酯鍵,。3.**靈敏度**:T7EI對(duì)錯(cuò)配DNA的識(shí)別非常靈敏,,能夠檢測(cè)并切割單堿基和多堿基的錯(cuò)配。4.**應(yīng)用**:T7EI常用于CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)導(dǎo)致的基因突變的鑒定,。它通過(guò)識(shí)別錯(cuò)配DNA來(lái)幫助鑒定基因編輯是否成功以及是否有非目標(biāo)效應(yīng),。5.**直接電泳檢測(cè)**:T7EI的產(chǎn)物可以直接通過(guò)電泳進(jìn)行檢測(cè),這使得它在實(shí)驗(yàn)操作中更為方便,。6.**來(lái)源**:T7EI來(lái)源于大腸桿菌菌株,,是一種麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP)和T7核酸內(nèi)切酶I(T7EI)的融合蛋白。7.**成本效益**:盡管T7EI在商業(yè)上使用時(shí)成本較高,,但它在大規(guī)模樣本測(cè)試中,,尤其是在基因突變鑒定方面,提供了一種有效的篩選方法,。8.**特殊注意事項(xiàng)**:T7EI能夠識(shí)別長(zhǎng)度大于或等于2bp的插入,、缺失或突變導(dǎo)致的錯(cuò)配DNA,但不能識(shí)別1bp的插入,、缺失或突變,。這些特點(diǎn)使得T7EndonucleaseI成為基因突變鑒定中一個(gè)非常有用的工具,尤其是在CRISPR/Cas9等基因編輯技術(shù)的應(yīng)用中,。Bradykinin (1-5)Multiplex Probe qPCR Mix 已預(yù)混了低濃度ROX參比染料,,適用于需要低濃度ROX校正的熒光定量PCR儀 。
DNA片段大小對(duì)磁珠法DNA凝膠回收試劑盒的回收率有影響,。根據(jù)搜索結(jié)果,,我們可以得出以下結(jié)論:1.**小片段DNA(小于200bp)**:對(duì)于小于200bp的DNA片段,回收率會(huì)下降,。這是因?yàn)樾∑蔚腄NA與固相基質(zhì)的結(jié)合力相對(duì)較弱,,因此相對(duì)損失較大,導(dǎo)致回收率降低,。在某些情況下,,小于100bp的DNA片段的回收率可能只有30-60%,。2.**中等大小片段DNA(200bp-4kb)**:在這個(gè)范圍內(nèi)的DNA片段,通?;厥章瘦^高,,可以達(dá)到80-95%。這是因?yàn)檫@些片段大小適中,,既不會(huì)因太小而損失,,也不會(huì)因太大而難以洗脫。3.**大片段DNA(大于4kb)**:對(duì)于大于4kb的DNA片段,,回收率也會(huì)下降,,通常在30-50%之間。這是因?yàn)榇笃蔚腄NA與固相基質(zhì)的結(jié)合力更強(qiáng),,因此更難洗脫,。4.**片段大小與回收率的關(guān)系**:DNA片段越大,和固相基質(zhì)的結(jié)合力越強(qiáng),,就越難洗脫,,回收率就越低。相反,,DNA的量越少,,相對(duì)損失越大,回收率也越低,。5.**操作技巧**:為了提高回收率,可以采取一些操作技巧,,比如減少切膠體積,、確保溶膠徹底、使用合適的洗脫液體積和pH值等,。
BloodGenomicDNAIsolationKitwithMagneticBeads是一種利用磁珠技術(shù)從血液中提取基因組DNA的試劑盒,。以下是一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**高效提取**:該試劑盒采用特殊的磁珠和緩沖體系,能夠快速且高效地從100μl至1ml的血液中分離和純化高質(zhì)量的基因組DNA,。2.**磁珠特性**:獨(dú)特的磁珠具有很強(qiáng)的核酸親和力,,在特定條件下可以快速分離和純化核酸。這些磁珠對(duì)磁場(chǎng)響應(yīng)迅速,,使得提取過(guò)程既安全又便捷,。3.**提取過(guò)程**:血液樣本在裂解液和蛋白酶K的作用下迅速裂解,釋放出的基因組DNA與磁珠特異性結(jié)合,。通過(guò)磁分離架的作用,,磁珠與溶液快速分離,經(jīng)過(guò)洗滌去除雜質(zhì),,用洗脫液將基因組DNA從磁珠上洗脫下來(lái),。4.**應(yīng)用廣**:提取的基因組DNA可用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如PCR擴(kuò)增、酶切,、基因分型,、Southern雜交、高通量測(cè)序,、基因組DNA文庫(kù)構(gòu)建等,。5.**操作簡(jiǎn)便**:整個(gè)抽提過(guò)程大約需要50分鐘,操作簡(jiǎn)便,,無(wú)需使用有毒有害的有機(jī)試劑,,如酚或氯仿,提高了實(shí)驗(yàn)的安全性,。6.**高純度和高回收率**:提取的DNA純度高,,A260/A280通常在1.7-1.9之間,表明蛋白和RNA的污染低,?;厥章释ǔ3^(guò)80%。
在PCR實(shí)驗(yàn)中,,為了避免引物與已知序列的交叉反應(yīng),,從而確保實(shí)驗(yàn)的特異性,以下是一些關(guān)鍵的引物設(shè)計(jì)原則和策略:1.**選擇高保守性區(qū)域**:引物比較好設(shè)計(jì)在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi),,這樣可以確保引物與目標(biāo)序列的特異性結(jié)合,。通過(guò)比較不同物種的同一基因序列,可以確定基因的保守區(qū),。2.**避免引物與非目標(biāo)序列的同源性**:設(shè)計(jì)引物時(shí),,應(yīng)避免與基因組中的重復(fù)序列、假基因或高同源性區(qū)域設(shè)計(jì)引物,??梢酝ㄟ^(guò)BLAST等工具對(duì)引物進(jìn)行同源性分析,確保引物只與目標(biāo)序列結(jié)合,。3.**引物長(zhǎng)度和GC含量**:引物長(zhǎng)度一般在15-30堿基之間,,常用的是18-27bp。GC含量一般為40%-60%,,以45-55%為宜,。過(guò)高或過(guò)低的GC含量都不利于引發(fā)反應(yīng),上下游引物的GC含量和Tm值應(yīng)保持接近,。4.**避免引物的3'端錯(cuò)配**:引物3'端的堿基應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),,特別是倒數(shù)第二個(gè)堿基,,以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。引物3'端比較好不要選擇A,,比較好選擇T,,因?yàn)楫?dāng)末位鏈為T(mén)時(shí),錯(cuò)配的引發(fā)效率降低,。5.**避免引物自身及引物之間的互補(bǔ)序列**:引物自身不應(yīng)存在互補(bǔ)序列,,否則引物自身會(huì)折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu),影響引物與模板的復(fù)性結(jié)合,。前后引物之間也不應(yīng)具有互補(bǔ)性,,尤其應(yīng)避免3'端的互補(bǔ)重疊以防止引物二聚體的形成。FnCas12a可以識(shí)別不同的PAM序列,,例如5'-TTN-3',,這增加了它可以靶向的基因組區(qū)域 。Recombinant Canine TAG-72 Protein,His Tag
FnCas12a在完成特異性切割后,,還能非特異性地切割其他單鏈DNA,,這一特性被用于開(kāi)發(fā)了多種核酸檢測(cè)技術(shù)。Recombinant Human CD8 alpha/CD8A Protein,His Tag
牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I(VacciniaVirusDNATopoisomeraseI)是一種來(lái)源于牛痘病毒的I型真核拓?fù)洚悩?gòu)酶,,具有以下功能和應(yīng)用:1.**功能**:-牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I可以催化雙鏈DNA分子中單鏈DNA特定序列位置的磷酸二酯鍵的斷開(kāi)和連接,。-具有解超螺旋的酶(DNARelaxingEnzyme)活性,能夠通過(guò)快速的酶切和連接使雙鏈共價(jià)閉合環(huán)狀的正或負(fù)超螺旋DNA發(fā)生解超螺旋,,形成含有較少的正或負(fù)超螺旋的雙鏈環(huán)狀DNA分子,。-能夠使雙鏈DNA形成繩結(jié)(knotting)或解開(kāi)繩結(jié)(unknotting),聯(lián)結(jié)互補(bǔ)的單鏈環(huán)狀DNA成為雙鏈環(huán)狀DNA,。2.**應(yīng)用**:-作為一種DNA重組連接的新型工具酶,,用于DNA載體和重組片段的連接、缺刻修復(fù),、接頭連接等,。-適用于TOPO克隆載體的制備,、NGS建庫(kù)中的接頭連接等,。-在TOPO克隆技術(shù)中,DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I同時(shí)具有限制酶和連接酶特性,,其生物學(xué)功能是在復(fù)制期間切割并重新連接DNA,。3.**使用方法**:-用于DNA快速酶切流程,包括配制體系反應(yīng)液,、輕柔混勻,、37℃孵育15分鐘等步驟。4.**儲(chǔ)存條件**:-建議在-25~-15℃保存,,有效期為3年,。5.**注意事項(xiàng)**:-避免起泡或劇烈攪拌,、渦旋等操作,以防止酶失活,。牛痘DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I因其獨(dú)特的功能,,在分子生物學(xué)研究和基因工程中扮演著重要的角色。Recombinant Human CD8 alpha/CD8A Protein,His Tag